V International Seminar in Animal Parasitology 322 October, 1-3, 2003, Merida, Yucatan, Mexico. 322

OBSERVACIONES PRELIMINARES DE LA EVOLUCIÓN ESTACIONAL DE POBLACIONES DE Haematobia irritans SOBRE GANADO LECHERO EN PASTOREO EN EL CENTRO DE MÉXICO

Maldonado Simán E. 1, Améndola Massiotti R1., Cadena Meneses J.A1, Bermudez V.L.2, Kunz S. E.3 1Departamento de Zootecnia. Universidad Autónoma Chapingo. UACH., 2Departamento de Parasitología Agrícola. Universidad Autónoma Chapingo. UACH, 3U.S. Livestock Insects Laboratory. ARS-USDA.

RESUMEN

La evolución estacional de la población de mosca del cuerno Haematobia irritans (L.) fue registrada a través de conteos semanales en vacas Holstein en pastoreo en el Campo Experimental de la Universidad Autónoma Chapingo del 6 de septiembre de 1997 al 29 de agosto de 1998. Se registraron densidades mayores a dos moscas por vaca a lo largo del año, con excepción de la segunda y tercera semana de enero. Las moscas adultas nunca desaparecieron de las vacas, indicando que si la diapausa ocurre en esta latitud, no afecta a toda la población de mosca. El mayor nivel de abundancia (392 moscas/vaca) se registró en mayo de 1998. La densidad de moscas se redujo entre el 15 de noviembre de 1997 y el 3 de enero de 1998, y aumentó entre el 14 de marzo y el 23 de mayo de 1998. Las variables climáticas mejor correlacionadas con los conteos de moscas fueron la temperatura mínima a la intemperie, promedio de temperatura y precipitación acumulada. Los porcentajes de mortalidad de la población en campo para un compuesto organofosforado (diazinón) y dos piretroides (cyhalotrina y permetrina) con el nivel DL50 fueron 97% y 5% respectivamente.

PALABRAS CLAVE: mosca del cuerno, ganado de leche, densidad de población, porcentaje de mortalidad.

1. INTRODUCCIÓN

La mosca del cuerno Haematobia irritans (L.) es un parásito obligado del ganado bovino, introducido a América de Norte en el siglo pasado (Kunz, 1995) y disperso actualmente en todo el continente (Guglielmone et al.,1997). Las poblaciones de este díptero se correlacionan con factores ambientales. Sin embargo, en México, este tipo de correlaciones han sido poco estudiadas (Kunz, 1991). La dinámica de población de H. irritans ha sido muy poco estudiada en esta latitud en ganado lechero bajo condiciones de pastoreo. Esta información es necesaria para diseñar la estrategia de control químico cuando la plaga excede el umbral económico. Haufe (1987) reporta que con infestaciones de 230 moscas por bovino de carne se presentan pérdidas significativas en la producción, sin embargo Guglielmone et al. (1998) indican que el umbral económico aún no ha sido determinado para ganado lechero. Uno de los mayores problemas para el control de esta plaga es el fenómeno de resistencia a los insecticidas. La resistencia a piretroides de H. irritans se desarrolló y dispersó en décadas pasadas, principalmente debido al uso de aretes impregnados con este grupo químico (Sheppard, 1984). Por lo tanto, es necesario determinar las tendencias cuantitativas en la resistencia y/o susceptibilidad de las diferentes áreas pecuarias para sugerir las estrategias de manejo considerando una resistencia potencial (Tabashnik, 1990). Los objetivos de esta investigación son determinar el porcentaje de mortalidad en las moscas de H. irritans expuestas a insecticidas piretroides y organofosforado y la fluctuación estacional de la población de mosca adulta por medio de conteos semanales en una zona en la que se aplican tratamientos sistemáticos con plaguicidas.

2. . MATERIALES Y MÉTODOS

El experimento se realizó entre septiembre de 1997 y agosto de1998 en el Campo Experimental de la Universidad Autónoma Chapingo en el Estado de México (19º 29’N, 98º 53’W y 2250 msnm). La población de H. irritans se midió semanalmente en praderas contando el número de moscas en 12-20 vacas Holstein en ambos lados del cuerpo del bovino entre las 08:00 y 10:00. (Guglielmone et al., 1997). Se correlacionaron los conteos de moscas con los datos climáticos diarios registrados por la Estación Meteorológica de la Universidad Autónoma Chapingo. Se utilizaron para los análisis el promedio de temperatura (ºC), promedio de la humedad relativa (%) -ambas medidas 1.5 m por encima del nivel del suelo-, promedio del déficit de saturación (mm Hg), y temperatura mínima a la intemperie (ºC), correspondientes a la primera, segunda, tercera y cuarta semanas previas a los conteos. En el caso de la precipitación (mm) se utilizó el valor total acumulado en las cuatro semanas previas a los conteos (Guglielmone et al., 1997). Las vacas recibieron aplicaciones de piretroides comerciales contra mosca del cuerno el 27 de septiembre de 1997, y el 10 de mayo, 19 de junio, 3 de julio y 10 de julio de 1998. Las vacas apacentaron en forma rotativa praderas de alfalfa (Medicago sativa L.) con zacate ovillo (Dactylis glomerata L.) y avena (Avena sativa L.) con ballico anual (Lolium multiflorum Lam.). Los períodos de descanso de las praderas variaron entre 30 y 45 días. Entre octubre y junio las praderas se regaron quincenalmente por aspersión recibiendo en promedio 67 mm por riego. Las vacas se ordeñaron entre las 07:00 y las 08:30 y entre las 15:00 y las 14:00. Para determinar el porcentaje de mortalidad de H. irritans se expusieron las moscas a diferentes concentraciones de insecticidas. Se aplicaron las técnicas de bioensayos con frascos de vidrio de 20 ml (Cilek y Knapp, 1986) y cajas de petri con filtros de papel Whatman® No. 1 (Sheppard y Hinkle, 1987). Se emplearon un insecticida organofosforado (diazinón, 0.01-0.06 µg/cm2) y dos insecticidas piretroides (permetrina y cyalotrina 2.5-6.0 µg/cm2). Para el análisis de los bioensayos se empleó el sistema POLO-PC (Probit Or Logit Analysis) (Russell et al., 1977). Las proporciones de mortalidad para la población susceptible de la mosca fueron determinadas (Kunz et al.,1995) en Knipling-Bushland U.S. Livestock Insect Research Laboratory USDA, ARS, Texas, USA.

3. RESULTADOS

La abundancia de estas moscas presentó valores más bajos durante el invierno (8 y 65 % de vacas infestadas), el resto del año el porcentaje de vacas infestadas varió entre 75 y 100%. Se identificaron cinco períodos de cambios en la densidad de moscas (Cuadro 1). Ésta fluctuó con una tendencia general decreciente entre 06/09/1997 y 14/11/1997 (Período 1). Durante el Período 2 (15/11/1997 a 02/01/1998) la densidad de moscas se redujo casi en forma constante. Durante el Período 3 (03/01/1998 a 13/03/1998) la densidad de moscas fue muy baja. Mostró un incremento exponencial en el Período 4 (14/03/1998 a 22/05/1998), alcanzando 392 moscas por vaca en la última semana de mayo (Figura 1). En el Período 5 (23/05/1998 a 29/09/1998) la densidad fluctuó aproximadamente entre 100 y 200 moscas por vaca. Las densidades altas aunque fluctuantes (123 ± 15 moscas vaca-1) se registraron en los períodos 1 y 5 (comprendidos entre mediados de primavera y mediados de otoño).

Los coeficientes de correlación con variables climáticas fueron más altos la semana previa a los conteos. La densidad de moscas se correlacionó mejor con las temperaturas mínimas a la intemperie para la totalidad del año (Cuadro 1); las otras variables climáticas tuvieron correlaciones más bajas. Durante el otoño, una vez que las temperaturas mínimas permanecieron predominantemente bajo 0°C, la densidad de moscas decreció casi de manera constante, mientras que en la primavera se incrementó constantemente cuando esas temperaturas sobrepasaron 0°C. Los cambios importantes de la población se presentaron en los períodos 2 y 4 (segunda mitad de otoño y primera mitad de primavera, respectivamente). Durante esos periodos, las otras variables climáticas diferentes a las temperaturas mínimas a la intemperie registraron una mayor asociación con la densidad de moscas (Cuadro 1).

4. DISCUSIÓN

En este medio ambiente templado se alcanzaron valores altos en la densidad de moscas y los adultos estuvieron presentes a lo largo de todo el año. En los períodos con poblaciones altas y fluctuantes, la densidad media registrada (123 ± 15 moscas vaca-1) representó el 50% del umbral económico mencionado por Haufe (1987) para ganado de carne, superándolo únicamente en una ocasión (23 de mayo). Es probable que sea ésta la razón por la cual no se haya encontrado relación entre la densidad de moscas y la producción de leche o el cambio de peso vivo. Existen dificultades para cuantificar con claridad el efecto nocivo de las moscas sobre la producción de leche (Guglielmone et al., 1998). Las fluctuaciones en densidad en esta región difieren de las reportadas en condiciones templadas de Argentina (Guglielmone et al., 1997) y Aguascalientes (Cruz et al.,2000), ya que ésta no presenta una clara distribución bimodal lo que probablemente se debe a temperaturas no muy elevadas y buena humedad durante el verano.

Cuadro 1. Coeficientes de correlación altamente significativos (p<0.01) de los parámetros climáticos en la semana previa a los conteos: promedio de temperatura (T), temperatura mínima a la intemperie (Tm), promedio en el déficit de saturación (DS), promedio en la humedad relativa (HR), precipitación (P) acumuladas cuatro semanas previas a los conteos y el logaritmo natural en el número de H. irritans por vaca durante los diferentes periodos de los cambios en la población.

Los mayores cambios en la densidad de mosca se relacionaron con las temperaturas mínimas a la intemperie, lo que indica que éste pudiera ser un buen parámetro para predecir los cambios de la población de mosca en esta región. El decremento en la densidad se produjo cuando esas temperaturas pasaron de valores predominantemente mayores a 0°C a valores predominantemente menores a 0°C yviceversa. Una vez que se produjeron cambios drásticos en densidad, la relación entre la población de moscas y las variables climáticas fue exponencial. Es probable que el efecto de las aplicaciones de piretroides en la evolución estacional de la población de H. irritans haya sido mínimo ya que los bioensayos mostraron un alto grado de resistencia de las moscas adultas a estos insecticidas.

Las variables que mostraron las correlaciones más altas fueron las temperaturas promedio y la precipitación acumulada. Durante el Período 3 no hubo asociación significativa entre la densidad de moscas y las variables climáticas. Los coeficientes de correlaciones durante el Período 5 fueron generalmente bajos. Los resultados de los dos bioensayos para organofosforados (diazinón) y piretroides (cyhalotrina y permetrina) muestran que el porcentaje de mortalidad en las poblaciones de mosca del cuerno para DL50 en organofosforados (diazinón) resultó ser significativa (¡Ý 95%), mientras que para los piretroides (cyhalotrina y permetrina) indicó un porcentaje poco significativo (5%). Una tendencia similar se presentó para la DL99 en los mismos productos químicos.

5. CONCLUSIONES

En este ambiente templado los adultos estuvieron presentes todo el año, la densidad de moscas alcanzó valores altos, únicamente en una ocasión. Las fluctuaciones en densidad no correspondieron a una clara distribución bimodal. Los mayores cambios en la densidad se relacionaron con las temperaturas mínimas a la intemperie de la semana previa a los conteos con un valor crítico de 0°C. Una vez que se produjeron cambios drásticos en la densidad, la relación entre la población de moscas y las variables climáticas fue exponencial. Las poblaciones de moscas mostraron un alto grado de resistencia a las aplicaciones de piretroides.

6. LITERATURA CITADA

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VIRULENCIA de Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana y Paecilomyces fumosoroseus (Hyphomycetes) SOBRE HUEVO DE Amblyomma cajenennse (Ixodidae).

Galindo-Velasco Edelmira1, Lezama-Gutiérrez Roberto2, Torres-Gómez J. F1., Angel-Sahagún Cesar Andrés1, López-Edwards Marilú2, Rebolledo-Domínguez Oscar2, Molina-Ochoa, Jaime2, y Cruz-Vázquez, Carlos3.

1 Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia 2 Facultad de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Km 40 Autopista Colima-Manzanillo, Tecomán, Colima, CP. 28100. . evelasco@ucol.mx, rlezama@ucol.mx
3 Instituto Tecnológico Agropecuario de Aguascalientes. A.P. 74-2, Admón.., Postal No. 2, C.P. 20041, Aguascalientes, Aguascalientes, México.

1. INTRODUCCIÓN

Los artrópodos hematófagos obligados de fauna silvestres y domésticos; son vectores de microorganismos causantes de enfermedades en animales y humanos (Samish y Rehacek, 1999), como la anaplasmosis, piroplasmosis, dermatofitosis, teileriasis y Rickettsiosis; infestaciones masivas pueden causar la muerte de sus hospederos pequeños y adultos (Mauleon et al., 1993; Riva et al., 2002). Los bovinos tienen las condiciones óptimas: olor, temperatura y alimento, que permite el desarrollo de varias especies de garrapatas; causan molestias y pérdida de sangre (Want, 1997). Se reporta que un bovino retrasa su crecimiento hasta 1 kg de peso vivo por cada 1,300 garrapatas que lleguen a la repleción. Un animal puede soportar una carga parasitaria de 10,000 a 100,000 garrapatas por año, lo que significa una merma de 7 a 70 kg/ año (Aguirre, 1986). Algunas especies: Dermacentor variabilis (Say), D. andersoni (Stiles), Amblyomma americanum (Linnaeus) y A. maculatum (Koch) A. cajennense (Fabricius) inoculan sustancias similares a neurotoxinas, que provocan parálisis, incoordinación y colapso. Un espécimen es capaz de producir parálisis en humanos, perros y borregos, pero en bovinos son necesarios más (Quiroz, 1990; Riva et al., 2002).

El control químico de las garrapatas tiene como desventaja la inducción de resistencia a algunos productos (Aguirre, 1986; Mauleon et al., 1993). Una alternativa puede ser el control biológico mediante el uso de hongos entomopatógenos. La especie Beauveria tenella (Delac.) se reporta asociada a Ixodes ricinus (Linnaeus) (Samsinakova et al., 1974) y Metarhizium anisopliae (Metschnikoft) evaluó sobre B. microplus (Canestrini) en condiciones de laboratorio y posta; Monteiro et al, 1994. Samish y Glazer, 1992), estos hongos se reportan inofensivos a los animales de sangre caliente y el ambiente (Maniana, 1991; Zimmerman, 1993), además, son los mejores patógenos de garrapatas por su amplia distribución, espectro de hospederos y habilidad para penetrar a sus hospederos vía cuticular (Samish y Rehacek, 1999).

En México, el género Amblyoma presenta 4 especies de importancia económica (Solís, 1993), sin embargo, se carece de estudios sobre la susceptibilidad de esta garrapata a hongos entomopatógenos. Se considera que los hongos presentan virulencia a esta especie. El objetivo del estudio fue determinar la virulencia de los hongo M. anisopliae, B. bassiana, P. fumosoroseus (Wize) (Deuteromycotina: Hyphomycetes) sobre huevos de Amblyoma spp. (Acarina: Ixodidae) en condiciones de laboratorio.

2. MATERlALES Y MÉTODOS

Se colectaron Amblyomma cajennense. pletóricas, de bovinos de la región y se llevaron al Laboratorio de Control Biológico; se lavaron con agua destilada estéril y se depositaron en cajas de Petri, con papel filtro húmedo. Se incubaron a 25 °C ±1, hasta las oviposturas (Galindo, 1988). Los huevecillos se separaron en grupos de 100 y se colocaron en cajas petri con papel filtro húmedo.

Los hongos empleados, M. anisopliae. Aislados Ma1 y Ma2, B. Bassiana aislados Bb36 y Bb21, P. fumosoroseus AMBAS1. Pertenecen a la colección de hongos entomopátogenos, de la Universidad de Colima; éstos se cultivaron en agar dextrosa Sabouraud, con 1 % de extracto de levadura y 500 ppm de cloranfenicol; se incubaron 21 días a 25 °C y 12 horas de luz/ oscuridad (Samish y Rehacek,1999). Se colectaron las conidias con agua destilada estéril, con 0.1 % de Tween 30 y se cuantificaron. Se formaron las concentraciones de lxl01, lxl02, Ixl03, lx104, lx105, Ix106, lx107 y lx108 conidias/ml, para el testigo agua destilada estéril. La inoculación se realizó aplicando 0.2 ml, de cada una de las concentraciones de cada aislado en cada grupo de 100 huevos.

Los aislados se evaluaron en diseño completamente al azar, con 9 tratamientos y 4 repeticiones. Cada 48 horas se registró el número de huevos infectados, hasta que las larvas del testigo emergieron. Los datos se analizaron mediante un análisis de regresión entre el Probit del número de huevos infectados y el logaritmo de la concentración de conidias y se determinaron las respectivas concentraciones letales 50% (CL50) (Finney, 1971).

3. RESULTADOS

Se encontró que las cinco cepas de hongos fueron capaces de micosar huevo de A. cajennense; tres de ellas, Mal y Ma2 de M. anisopliae y Bb36 de B. bassiana, micosaron el 100% de los huevos; la cepa Pfr11 de P. fumosoroseus causó un 29.25% de micosis y una de B. bassiana (Bb21) solo el 7% de los huevos se infectaron. El análisis de varianza mostró que existen diferencias en la virulencia de los hongos evaluados (Cuadro 1). La prueba de Tukey separó a los aislados en dos grupos, el mas sobresaliente formado por los aislados Mal, Ma2 y Bb36, sin diferencias entre ellas y en segundo lugar a los de P. fumosoroseus Pfr11 y Bb21.

Los valores de CL50% de los aislados que micosaron el 100% de los huevos, indican que el aislado Ma2 con valores de 1.3x104 conidias/ml resultó ser el más virulento; seguido por los Mal y Bb36 para la CL50% de 1.3 xl06 y l.4xl06 conidias/ml respectivamente (Cuadro2).

Cuadro l. Análisis de varianza, del porcentaje de virulencia de los hongos entomopatógenos en huevo de Amblyomma cajennenese, bajo condiciones de laboratorio.

Cuadro 2. Concentraciones letales 50% de los hongos M anisopliae- aislados MaI y Ma2 B. bassiana Bb36, en huevo de Amblyomma sp.

4. DISCUSIÓN

Reportes previos mencionan que bajo condiciones naturales, especies de garrapatas como Ixodes ricimis L., Dermacentor marginatus y D. reticulatus; son susceptibles a hongos entomopatógenos, B. bassialla, B. tenella, Aspergillus parasiticus, Cephalosporium coccorum y P. fumosoroseus (Samsinakova et al., 1974). Bajo condiciones de laboratorio, la especie B. microplus ha sido reportado susceptible a M. anisopliae (Correia et al., 1998), del mismo modo, adultos de la especie A. variegatum son susceptibles a M. anisopliae y B. bassiana (Kaaya et al., 1996). En este estudio se encontró que el estado biológico de huevo de A cajennense. es susceptible a los hongos M. anisopliae, Ma 1, Ma2; en B. Bassiana, Bb36, y P. fumosoroseus Pfr11; lo anterior demuestra que la virulencia varia de acuerdo a la especie de hongo y cepa.

La concentración de lxl08 conidios/ml, de las dos cepas de M. Anisopliae, Ma1 y Ma2, y de la Bb36, infectaron e inhibieron la viabilidad del huevo en un 100%; estos resultados son consistente con los reportes de Lezama y Hernández, (1989) y de Kaaya et al., (1996) al utilizar cepas M. anisopliae y B. bassiana encuentra que hembras repletas inoculadas con estos hongos mueren en un 37% por M anisopliae; disminuyen la repleción, la ovipostura y la viabilidad del huevo hasta en un 100%. Estos autores mencionan que el efecto de los hongos sobre los parámetros reproductivos son importantes, por que no obstante que los adultos tratados con hongos no mueren en cantidades significativas, sin embargo, afectan de manera secundaria a la siguiente generación.

Los resultados de este estudio complementan lo reportado por Kaaya et al., (1996), por el hecho de que el hongo M. anisopliae Ma2 puede ser seleccionado para futuras investigaciones, bajo condiciones de campo y evaluar el impacto de su uso en la disminución de poblaciones naturales de garrapatas, partiendo del hecho de que ya se conocen metodologías de producción masiva y formulaciones de hongos (Khachatourians, 1986, Quimby et al., 1999, Daigle et al., 1998, Goettel, 1984).

5. LITERATURA CITADA

Aguirre, E.J.A. 1986. "La resistencia de la garrapata en México". Cebú 12: 54 - 60.

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Finney, D. J. 1971. Probit. analisis. Cambridge University Press. Cambridge.

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Kaaya, G.P., Mwangi, EN. y Ouna, EA 1996. "Prospects for biological control of livestock ticks, Rhiphicephalis appendicu/atlls and A. variegatum, using the entomogenous fungi B. bassiana andM anisop/iae." Joumal ofJnvertebrate Pathology. 67: 15-20:

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Lezama, G.R. y Hemández, AC. 1989. "Acción ovicida de Metarhizillm anisopliae (Metsch) Sor. en el control de Boophi/lIs spp." XII Reunión Nal. de Control Biológico. Memorias. Torreón, Coab. México. pp. 129-132.

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SUSCEPTIBILIDAD DE HUEVOS DE Riphicephalus sanguineus (Acarina: Ixodidae) A HONGOS ENTOMOPATÓGENOS (Deuteromycotina: Hyphomycetes)

Galindo-Velasco E., Lezama-Gutiérrez R., Ibáñez-Reducindo G1, Angel-Sahagún C. A.1, López Edwards M.2, Molina Ochoa, J.2, Rebolledo-Domínguez O.2 y Cruz Vázquez, C.3.

1 Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia 2 Facultad de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Km 40 Autopista Colima-Manzanillo, Tecomán, Colima, CP. 28100. . evelasco@ucol.mx, rlezama@ucol.mx

3 Instituto Tecnológico Agropecuario de Aguascalientes. A.P. 74-2, Admón.., Postal No. 2, C.P. 20041, Aguascalientes, Aguascalientes, México.

1. INTRODUCCIÓN

El perro forma parte importante en la evolución del hombre, significa compañía, contacto físico y centro de atención; también, se le utiliza en labores útiles, como guardián, pastor, buscador de drogas y guía, entre otros (Jones, 1981); como todos los animales son afectados por plagas y enfermedades (Inokuma et al., 1999). Dentro de ellos las garrapatas y son vectoras de agentes infecciosos (Hoskins y Cupp, 1998), tales como Anaplasma, Babesia, Coxiella, Erlichia (Hibler, 1986), bacterias y virus (Quiroz, 1984), además, provocan daños en piel poseen acción antigénica y tóxica que produce prurito, dolor y reacción inflamatoria, así como problemas de anémia y abortos (Szabo et al., 1999).

Las garrapatas asociadas a perros pertencen a los géneros de Amblyomma, Ixodes, Dermacentor, Rhipicephalus y Haemaphysalis (Garris, 1991). Su control se realiza mediante el uso de productos químicos (Garris, 1991); sin embargo trae consigo problemas de contaminación y la aparición de resistencia a los químicos (Froyd, 1997). La tendencia actual es buscar métodos que permitan el control de garrapatas sin afectar el ambiente; el control biológico no ha sido desarrollado en garrapatas que atacan perros (Dreyer et al., 1997). En bovinos se han evaluado hongos entomopatógenos en garrapatas, principalmente Metarhizium anisopliae anisopliae (Metsch.) Sor., Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., B. brongniartii (Petch.), Paecilomyces fumosoroseus (Wize) Brown y Smith, P. farinosus, Nomuraea rileyi (Farlow) Sansón, Metarhizium anisopliae acridum, Verticillium aranearum y V. lecanii, para el control de Boophilus spp., Amblyomma spp., Ixodidae sp. y Rhipicephalus apendiculatus (De Castro, 1997; Kalsbeek et al., 1995; Kaaya et al., 1996; Zhioua et al., 1997).

Se han evaluado las especies M. anisopliae y B. bassiana en R. appendiculatus y sobre A. variegatum (Kaaya et al., 1996; Samish y Rehacek 1999), pero no existen reportes sobre la susceptibilidad en R.. sanguineus a hongos. En el presente estudio se reporta la susceptibilidad del huevo de R. sanguineus a los hongos entomopatógenos M. anisopliae anisopliae, M. anisopliae acridum (Driver y Milner) (=M. flavoviride), B. bassiana, P. fumosoroseus y Nomuraea rileyi (Farlow) Sansón, bajo condiciones de laboratorio.

2. MATERIAL Y MÉTODOS

El presente trabajo se realizó en el Laboratorio de Control Biológico de la Dependencia de Educación Superior (DES): Ciencias Agropecuarias de la Universidad de Colima. Los aislados que se utilizaron M anisopliae anisopliae (capa Ma1 y Ma7), B. bassiana (Cepa 36 y Bb40), P. fumosoroseus (Pfr11), N rileyi (Cepa 1) y M. anisopliae acridum (cepa Ma 28), forman parte de la Colección de Hongos Entomopatógenos, de la Universidad de Colima (Cuado 1). El aislado Ma 1 fue proporcionado por el Dr. Arthur Mendoòa (IAA/PLANALSUCAR, Halagoas, Barasil.

Cuadro 1. Origen de los hongos entomopatógenos utilizados en este estudio.

Los hongos, a excepción de N rileyi, se multiplicaron en. agar dextrosa Sabouraud, con 1 % de extracto de levadura y 500 ppm de cloranfenicol. N. rileyi se multiplicó en jugo de ocho verduras (Fargues y Rodríguez-Rueda, 1980) y se incubaron por 21 días, a 25°C y 12 horas de luz/oscuridad. Los conidios se colectaron en agua destilada estéril, con 0.1% de Tween 30, se cuantificaron en una cámara hematimétrica de Neubauer y por dilución, se formó la concentración de 1xl08 conidas/ml (Zhioua et al., 1997). Simultáneamente se colectaron garrapatas pletóricas de perros, las cuales se identificaron utilizando claves (Munguía, 1995., Bayer, s/a). Las garrapatas se colocaron en cajas Petri con una capa doble de papel filtro húmedo, hasta obtener la ovipostura.

Se formaron grupos de 100 huevos de 48 horas de edad y se colocaron sobre una capa doble de papel filtro húmedo, dentro de una caja de Petri (60x15 mm), se inocularon con 0.2 mI de la concentración mencionada y se incubaron a una temperatura de 25±1 °C (Galindo, 1988). Cada tratamiento se evaluó con cuatro repeticiones. A cuatro grupos de huevos se les aplicó 0.2 mI de agua destilada estéril y se consideraron como testigo. Cada 48 horas se registró el número de huevos con micosis, hasta la emergencia de las larvas en el testigo. Los tratamientos se distribuyeron al Azar y los datos del porcentaje de huevos con micosis fueron sometidos a un análisis de varianza y prueba de separación de medias por Tukey 0.05, previa transformación angular del porcentaje (arc seno ã%) (SAS, 1997). De la misma manera se realizaron análisis Probit entre logaritmo del tiempo y el Probit del número de huevos con micosis, para estimar los Tiempos Letales 50% (TL50) para los aislados que presentaron acción ovicida (Finney, 1971).

3. RESULTADOS

Los huevos de R. sanguineus resultaron susceptibles a los hongos B. bassiana cepas Bb 36 y Bb 40, M. a. anisopliae cepas Ma1 y Ma 7 y P. fumosoroseus cepa Pfr 11. No presentaron susceptibilidad a las cepas de N rileyi y M. a. acridum. El 100% de los huevos inoculados con las cepas de B. bassiana, M. a. anisopliae y P. fumosoroseus fueron infectados (Cuadro 2). El análisis de varianza mostró diferencias estadísticas entre los tratamientos (F. cal. = 261.54; P > F= 0.0001). Basándose en los porcientos de micosis la prueba de separación de medias, no se encontraron diferencias estadísticas entre las cepas que infectaron huevo, a excepción de la cepa Bb 36. Del mismo modo, los valores de TL50 de los hongos variaron entre 3.7 y 13.3 días. La cepa Ma1 y Ma 7 presentaron valores de 5.3 y 5.8 días, respectivamente; las cepas de Bb 36 y Bb40 presentaron un rango de 7.3 a 13.3 días, respectivamente y la cepa de Pfr presentó el menor valor de todos los aislados (3.5 días) (Cuadro 2).

Cuadro 2. Porcentaje de huevo de R. sanguineus con micosis y tiempos letales 50% (TL50) en dias, de cepas de los hongos entomopatógenos M. anisopliae, B. bassiana, P. fumosoroseus y N. rileyi y prueba de separación de medias por Tukey 0.05.

IC= 95 % de Intervalo de Confianza

Letras iguales entre columnas no son diferentes estadísticamente 0.05

4. DISCUSIÓN

Se encontró que los huevos de R. sanguineus son susceptibles a las cepas de los hongos M. a. anisopliae, B. bassiana y P. fumosoroseus, pero no fueron susceptibles a las de M. a. acridum y N. rileyi. En huevos de Boophilus microplus (Canestrini), Rijo (1995) reporta que B. bassiana infecta hasta un 92 % huevos, lo que demuestra que esta especie es capaz de micosar huevos de diferentes especies de garrapatas, incluso de diferentes géneros. Del mismo modo, Vázquez (1994) reporta valores de hasta el 99.5% en huevo de B. microplus, a la concentración de lxl08 conidias/ml. En este estudio la cepa Bb 40 micosó el 100% del huevo inoculado, pero la cepa Bb 36 sólo el 86% y resultó estadísticamente diferentes entre sí, lo que demuestra que existen diferencias en patogenicidad, entre capas de una misma especie de hongo, tal como lo cita Ignoffo (1987). Las diferencias en virulencia entre los aislados se puede atribuir a las condiciones experimentales, al hospedero y su estado biológico, tal como lo reportan Maniania (1991).

En lo referente a la especie M. a. anisopliae, ambos aislados micosaron el 100% de los huevos inoculados. Kaaya et al. (1996) reporta que M. anisopliae y B. bassiana causan una reducción de hasta un 99% en la fecundidad de adultos, 100% la emergencia de larvas, asi mismo es capaz de matar hasta el 100% en larvas, el 95% de ninfas y 64% adultos en R. appendiculatus. Lo que corrobora la potencialidad de uso de estos hongos en el control de especies de Rhipicephalus. Este es el primer reporte de P. fumosoroseus atacando huevos de R. sanguineus, con valores del 100% de micosis, lo que lo hace un candidato potencial como agente de control biológico de R. sanguineus. Se recomienda que se evalúen su virulencia en los otros estados biológicos de diferentes especies de garrapatas.

5. LITERATURA CITADA

Bayer, s/a. Garrapatas del bóvido. Departamento Veterinario. Leverkusen, Alemania.

De Castro, J. J., James, A. D., Minjauw, B., Digiulio, G. U., Permin, A., Pegram, R. G., Chizyuca, H. G. B. y Sinyangwe, P. 1997. Long-term studies on the economic impact of ticks on sanga cattle in Zambia. Exp. Appl. Acarol. 21: 3-19.

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